MODE D’EMPLOI
Milieu simple concentration
- Ensemencer les tubes avec 1 mL d'inoculum et de ses dilutions décimales successives.
Milieu double concentration
- Ensemencer les tubes avec 10 mL d’inoculum.
- Recouvrir d’un bouchon de gélose stérile (Agar bactériologique type E A1012) préalablement
maintenue à 44-47°C.
Incubation
- Pour les coliformes, incuber pendant 24 heures à 30 ou 37°C suivant le protocole analytique à
respecter.
- Pour les coliformes thermotolérants, incuber 24 heures à 44,5°C.
- A partir des tubes à double concentration, transférer une öse bouclée de culture dans un tube à
simple concentration et incuber à nouveau pendant 24 heures avant d’effectuer la lecture.
LECTURE
La fermentation du lactose qui se traduit par l’apparition de gaz dans les cloches de Durham
(volume au minimum égal au 1/10ème du volume de la cloche) en 24 heures, indique le présence
de coliformes. L’identification des germes peut être pratiquée à partir des tubes gazogènes au
moyen de subcultures sur des milieux gélosés appropriés : gélose lactosée au BCP (BK023) ou
gélose EMB (Levine) (BK056).
FORMULE-TYPE
(pouvant être ajustée de façon à obtenir des performances optimales)
Pour 1 litre de milieu :
- Tryptone .......................................................................................20,00 g
- Bile de boeuf bactériologique.........................................................5,00 g
- Lactose ........................................................................................10,00 g
- Pourpre de bromocrésol.................................................................0,01 g
pH du milieu prêt-à-l’emploi à 25°C : 7,3 ± 0,2.
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